Биотехнолог

Обязанности

Создание генно-инженерных конструкций. Синтез гена. Синтез генома. Работа с Escherichia coli и Saccharomyces cerevisiae.

Необходимые навыки и опыт:

• Работа с E. coli: культивирование, подготовка компетентных клеток, трансформация. Понимание зачем используются разные штаммы, каковы их свойства.
• Генная инженерия: создание генно-инженерных конструкций. Понимание разных методов и стратегий сборки конструкций: рестрикция и лигирование, сборка по гомологичным концам (по Гиббсону), сборка ПЦР.

Желательные навыки:

• Опыт самостоятельного решения поставленной задачи. Например, сборка генетической конструкции, синтез необходимых последовательностей, доставка в клетки, подтверждение результата.

• Навыки и опыт по синтезу ДНК из олигонуклеотидов.

• Навыки и опыт работы с Saccharomyces cerevisiae. Культивирование, подготовка компетентных клеток, трансформация. Работа со сферопластами дрожжей, приготовление сферопластов, трансформация сферопластов.

• Навыки и опыт работы с бактериофагами. Понимание биологии бактериофагов.

• Навыки и опыт работы по выделению рекомбинантных белков и созданию продуцентов из E. coli. Навыки и опыт работы с системами хроматографической очистки белков. Знание способов получения функционально активных белков, особенностей выращивания продуцентов, индукции экспрессии, рефолдирования белков, если они получены в виде телец включения.

• Экспрессия белков в дрожжах (Saccharomyces/Pichia). Навыки и опыт работы по выделению рекомбинантных белков и созданию продуцентов из дрожжей.

• Навыки и опыт по редактированиею геномов с помощью систем лямбда-ред или CRISPR/Cas в бактериях.